实验室生物切片制作原理发表时间:2023-06-13 11:58 实验室生物切片是一种常见的方法,用于制备细胞和组织的切片以供观察和研究。下面将介绍实验室生物切片制作的基本原理。 1. 组织固定:首先,需要将生物样本进行固定。固定的目的是保持样本的结构和形状,并防止其受到损伤。常见的固定方法包括用甲醛、乙醛等化学试剂进行浸泡处理,或使用冰冻固定法将样本迅速冷冻。 2. 脱水:固定后的生物样本中存在大量的水分,需要进行脱水处理。脱水的目的是去除水分,为后续的切片和染色操作做准备。通常采用逐渐升级的醇浓度,如70%、80%、90%,最后浸入无水醇中进行脱水。 3. 渗透:脱水后,生物样本需要进行渗透处理。渗透剂可以使切片质地均匀,有助于保持细胞和组织的形态。常用的渗透剂包括二甲苯、醋酸纤维素等。 4. 包埋:渗透处理后,生物样本需要进行包埋,以便固定在切片中。常见的包埋材料包括石蜡和树脂。石蜡是最常用的包埋材料,通过石蜡包埋后的样本可以制备常规切片。而树脂包埋则适用于要求更高质量的切片,如超薄切片等。 5. 切割:包埋后,生物样本需要进行切割制备切片。切割可以采用手工切片或者自动切片机来完成。手工切片时,使用显微镜下的微型切片刀切割样本。自动切片机则可根据事先设定的参数进行自动切割。 6. 切片染色:切片制备完成后,需要对切片进行染色。染色可以增加对细胞和组织的可视性,有助于观察和研究。常见的染色方法包括常规染色、免疫染色、核酸染色等。 7. 封片:染色后的切片需要进行封片,以保护切片并避免干燥。通常使用有机溶剂将切片和封片材料结合,如封片剂、云母片等。 综上所述,实验室生物切片制作是一个复杂的过程,包括固定、脱水、渗透、包埋、切割、染色和封片等步骤。每一步都需要精确的操作和适当的处理条件,以确保样本的质量和切片的可观性。生物切片制作的成功与否直接影响到后续的观察和研究结果,因此在实验室中需要严格控制各个步骤的操作和条件。 |