组织切片裂隙产生的原因与对策

新乡市红叶教学仪器有限公司供应组织切片

在日常病理技术工作中 ,我们经常会遇到组织切片有大小不等、形状不一的裂隙 ,特别是富含细胞的组织这种现象更为常见。我们通过摸索和实践 ,针对组织切片裂隙的原因加以分析 ,用以下简便方法有效地减少或纠正了组织切片的裂隙 ,现介绍如下。

1   材料与方法

1.1 材料  

①常规制片中组织切片出现裂隙的蜡块,如淋巴结、扁桃体等;

②带盖的广口玻璃容器或塑料容器;

③医用纱布或脱脂棉;

④5 mmolPL盐酸:取1613 ml浓盐酸加蒸馏水至200 ml ,即可得5 mmolPL浓度盐酸溶液。

1.2 方法

①将切片中出现裂隙的组织蜡块面朝下 ,置入带有5mmolPL盐酸的容器内,浸泡5～10 min ,取出后用干纱布擦去蜡块表面的盐酸;

②蜡块不需冷冻,在室温(25 ℃) 下直接上切片机切片,厚度4μm ;

③裱片时,先将切片光面朝下 放入冷水中,然后,再用干净的载玻片将其移入漂片仪的水槽内,温度约45～47 ℃,略展片刻,待切片充分展平后,迅速裱贴在载玻片上;

④常规烘P烤切片、染色、封固。

3 讨论   

        组织切片裂隙[1]是常规制片中经常出现的一大问题 ,不仅影响切片质量 ,而且妨碍诊断。常见的裂隙有的呈不规则分布,类似“哈密瓜皮”样改变(图 1) ; 有的呈平行状规则分布 ,类似“百页窗”样改变。根据我们的经验和体会 ,组织切片裂隙的产生主要有以下几个方面的原因:

        ①组织处理: 由于大部分医院通常是把大小不一的标本混合处理 ,难免会出现标本处理不均的现象。要么大的组织标本处理不足,要么小的组织标本处理过度 ,切片的裂隙多出现在固定不好、偏小、偏薄的组织 ,特别是细胞成分过多的组织 ,如淋巴结组织、扁桃体组织等。这类组织细胞致密 ,含水量少 ,易被处理过度 ,导致质地硬脆。

        ②组织切片:切片时刀座不稳;使用的一次性刀片松动、切片刀钝、切片角度过于倾斜、切片动作太快太猛和蜡块过于冷冻质地变硬等 ,造成切片时组织出现震颤 ,在镜下表现为切片出现沿刀刃方向平行的波纹 ,类似“百页窗”样改变。此外 ,裱片的水温太高 ,亦可导致组织切片出现人为裂隙。

        鉴于上述原因 ,为了减少或纠正组织切片的裂隙 ,我们建议如下:

        ①在组织处理时 ,有条件的单位选择大小标本分开处理的方式。标本固定选择正确的固定液及固定浓度 ,不能直接用甲醛原液固定组织 ,通常选用 4%中性缓冲甲醛液作为常规组织固定液 ,固定好后再上机处理 ,标本取材不易过薄。

        ②技术人员在每次切片前要仔细检查机器 ,拧固刀座 ,夹紧刀片 ,防止因机械部分的松动而出现切片裂隙。调整并固定切片的角度 ,将切片流程分为粗修和细切 ,这样可以有效地保护切片刀 ,延长切片刀的使用寿命[2] 。

        ③裱片的水温以 45～47 ℃为宜 ,以免水温过高 ,造成切片扩散 ,形成人为裂隙。

        ④对于一般的组织蜡块 ,切片时冷冻温度以-5 ℃为佳 ,不能过低 ,否则蜡块太硬 ,切片时蜡块接触刀刃易产生震颤 ,导致切片出现波纹状裂隙。对于硬脆的组织 ,可利用盐酸能够软化组织的特点 ,减低组织的硬度和脆性(图 2) 。组织蜡块短时间浸泡在沾有5mmolPL盐酸的纱布或脱脂棉上 ,达到暂时软化组织蜡块的作用而不会损伤组织 ,对组织结构无任何改变 ,不影响切片的正常使用。

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